EINLEITUNG
Die Gattung Vibrio besteht aus Gram-negativen geraden oder gebogenen Stangen, stören durch einen einzigen polaren Geissel.Vibrios sind in der Lage, sowohl Atemwegs-und fermentativer Stoffwechsel.O2 ist ein universelles Elektronen-Akzeptor; sie nicht denitrify.Die meisten Arten sind Oxidase-positiv.In den meisten Möglichkeiten vibrios sind im Zusammenhang mit Darmbakterien, aber sie teilen einige Eigenschaften mit Pseudomonaden gut.Vibrionaceae Die Familie findet sich in der "Facultatively Anaerobe Gram-negative Rods" in Bergey's Manual (1986), auf der Ebene mit der Familie Enterobacteriaceae.In der revisionistischen Taxonomie von 2001 (Bergey's Manual), basierend auf phylogenetische Analyse, Vibrionaceae, Pseudomonadaceae und Enterobacteriaceae sind alle landeten in der Gammaproteobacteria.Vibrios zeichnen sich aus durch enterics-Oxidase-positiv und stören durch polare Geißeln.Vibrios zeichnen sich aus durch die fermentative Pseudomonaden als auch in ihrer oxidativen Stoffwechsel.Von den vibrios, die klinisch signifikant auf den Menschen, Vibrio cholerae, der Agent von Cholera, ist das wichtigste.

vibrios Die meisten haben relativ einfache growth factor Anforderungen und wächst in den synthetischen Medien mit Glukose als einzige Quelle von Kohlenstoff und Energie.Allerdings sind in der Regel seit vibrios marinen Organismen, die meisten Arten benötigen 2-3% NaCl-oder Meerwasser Basis für ein optimales Wachstum.Vibrios unterscheiden sich in ihrer ernährungsphysiologischen Vielseitigkeit, aber einige Arten wachsen wird auf mehr als 150 verschiedene organische Verbindungen als Kohlenstoff-und Energiequellen, die am selben Ebene wie der metabolischen Vielseitigkeit Pseudomonas.In flüssigen Medien sind vibrios stören von polaren Geißeln, die in einem geschlossenen Mantel kontinuierlich mit der äußeren Membran der Zellwand.Auf festen Medien können sie synthetisieren zahlreiche seitliche Geißeln, die nicht ummantelte.

Vibrios sind eine der häufigsten Organismen in Oberflächengewässern der Welt.Sie treten in den beiden Meeres-und Süßwasser-Habitate und in den Vereinen mit aquatischen Tieren.Einige Arten sind biolumineszent und leben in mutualistischen Verbände mit Fischen und anderen Meeresbewohnern.Andere Arten sind pathogen für Fische, Aale und Frösche sowie anderen Wirbeltieren und Wirbellosen.V. cholerae und V. parahaemolyticus sind Krankheitserreger des Menschen.Beide produzieren Durchfall, aber in einer Art und Weise, die völlig anders.V. parahaemolyticus ist ein invasiver Organismen, die in erster Linie dem Doppelpunkt; Cholerae ist nicht invasiv, die den Dünndarm durch die Sekretion von Enterotoxin.Vibrio vulnificus ist ein aufstrebender Erreger des Menschen.Dieser Organismus verursacht Wundinfektionen, Magen-Darm, oder ein Syndrom, bekannt als "primäre Sepsis."

METHODIK
VERSUCH: 1
Sammlung von Proben (Collins et al, 1973):
Marine Proben wurden in verschiedenen Orten der Region Rameshwaram marine (Palk Bucht) in einer Tiefe von 1 — 2 m an verschiedenen Standorten.Abwasser-und Bodenproben gesammelt wurden, und um GRD College Campus.

VERSUCH: 2
2,1.Bakterielle Enumeration (Mary et al, 1985):
Anzahl der culturable, Aerobic, heterotrophen Bakterien im Wasser-und Sedimentproben wurde durch plating on marine-und Nährstoff-Agar-Agar.Für marine Isolate, die Medien wurden von den 3,5% Natriumchlorid (NaCl).Dann werden die plated ausgebrütet wurden in angemessener Zeit und Temperatur.

VERSUCH: 3
3,1.Isolierung von Vibrio spp aus Wasser-und Sedimentproben (Mary et al, 1985):
Verschiedene selektive Medien wurden für die Isolierung von Vibrio sp aus marinen Quelle.Für marine Isolate, die Medien wurden von den 3,5% Natriumchlorid (NaCl).Medien für die Isolierung von Vibrio sp sind 1.Thiosulfate Zitrat Bile Saccharose-Agar (mit 3,5% NaCl) 2.Marine Agarmedium

VERSUCH: 4
4,1 Identification
Mikroskopie: Gram-Färbung und Merkmale Zelle Morphologien wurden, die durch Standard-Methoden (Gerhardt et al., 1981).Motilität beobachtet wurde in nassen mount mit Mikroskop.
Kulturelle Merkmale: Kolonie Morphologie verschiedener Isolate von Vibrio sp beobachtet wurden auf Nutrient Agar-Agar, Thiosulfate Zitrat Bile Saccharose-Agar (TCBS), Blut-Agar, Mac conkey Agar Agar Mannitol Salz und Ergebnisse wurden tabelliert.
Physiologische Charakterisierung: Vorläufige physiologische Charakterisierung wie Katalase-Test-, Stärke-Hydrolyse-Test, Indol-Test, Test MRVP, Citrat-Test, Oxidase-Test, Test-String, Kohlenhydrat-Fermentation-Test (Zucker verwendet-Saccharose, Lactose, Glucose, Maltose, Mannitol), Cholera roten Reaktion wurden Und Ergebnisse wurden tabelliert.

VERSUCH: 5
Anti mikrobiellen Empfindlichkeit Test Kirby-Bauer-Methode
Vorgehensweise:
1.Machen Sie eine Aussetzung zu einem angemessenen Trübung der bakteriellen Kultur getestet werden.
2.Legen Sie eine sterile Wattestäbchen in der bakteriellen Aussetzung und entfernen Sie die überschüssige Flüssigkeit durch Drücken und Drehen der Baumwolle gegen die Innenseite der Röhre oberhalb der Flüssigkeit.Der Tupfer ist streifte in mindestens drei Richtungen über die Oberfläche der Mueller-Hinton Agar-Nährböden und TCBS erhalten einheitliche Wachstum.Eine endgültige Sweep besteht aus rund um den Rand des Agar-Agar.Vergewissern Sie sich, dass für die Serie confluency.
3.Lassen Sie die Platten zu trocken für fünf Minuten.
4.Mit sterilen Pinzetten, Ort Disketten mit den folgenden Antibiotika auf der Platte: Penicillin G, Ampicillin, Cephalothin, Erythromycin, Tetracyclin, Methicillin, Streptomycin oder andere geeignete Antibiotikum Festplatten.
5.Inkubieren die Platten innerhalb von 15 Minuten nach dem Auftragen der Festplatten.Die Platten sollten ausgebrütet bald nach dem Einlegen der Platten, da die Prüfung standardisiert ist unter Bedingungen, wo die Verbreitung von Antibiotika-und Bakterien beginnen in etwa zur gleichen Zeit.
6.Nach der Inkubation über Nacht, Messung der Durchmesser der Zone der Wachstumshemmung um jede Festplatte auf die nächste ganze mm.Überprüfen Sie sorgfältig die Platten für die gut entwickelte Kolonien in der Zone der Hemmung.
7.Mit Hilfe eines Standard-Tabelle der Antibiotika-Empfindlichkeiten, festzustellen, ob der Stamm ist resistent, Aufsteiger, oder anfällig für die Antibiotika getestet.

ERGEBNISSE UND DISKUSSION
Insgesamt 35 Proben wurden in verschiedenen Orten der Region marine, Gartenerde , Abwasser-und Innenpolitik water.Vibrio Bakterien sind gram-negative und weitgehend halophiler.Vibrio ist stabförmigen, und kann gerade oder gebogen.Sie sind Organismen stören, mit einem einzigen polaren Geissel zu reisen.Vibrios sind eine der häufigsten Organismen in Oberflächengewässern der Welt.Sie treten in den beiden Meeres-und Süßwasser-Habitate und in den Vereinen mit aquatischen Tieren.Einige Arten sind biolumineszent und leben in mutualistischen Verbände mit Fischen und anderen Meeresbewohnern.Diese Proben wurden durch die gängigen Verfahren wie selektive Medien (unten aufgeführten), Gram-Färbung, feuchte mount Beobachtung für die Beweglichkeit und Bio-chemische Tests beinhaltet Katalase-Test-, Stärke-Hydrolyse-Test, Indol-Test, Test MRVP, Citrat-Test, Oxidase Test, Test-String, Kohlenhydrat-Fermentation-Test (Zucker verwendet-Saccharose, Lactose, Glucose, Maltose, Mannitol), Cholera roten Reaktion wurden durchgeführt und die Ergebnisse wurden tabelliert für die Identifizierung von Vibrio sp aus der obigen Proben, und das kann verarbeitet werden, die Einzelheiten der Beschreibung wie abgebildet

COLONY MORPHOLOGY OF Vibrio sp.
MEDIA DETAILS
Nutrient Agar Moist, durchscheinend, regelmäßige, Disc-förmigen, 1-2mm in der Größe, bläulicher Tönung kann man im übertragenen Licht als unverwechselbare Farbe
Mac Conkey Agar Farblos Kolonien nach längerer Inkubationszeit rosa Farbe Kolonien waren.(Platte: 2)
Blood Agar Kolonien waren, umgeben von einer Zone von Hämolyse
Thiosulfat wurden Salz-Citrat-Agar Kolonien sind in der Farbe gelb durch Gärung.
Mannitol Salz Agar Nr. prominente Wachstum beobachtet wurde.

Die Kolonie Morphologie von Vibrio unterschiedlichen Stämmen wurde während der Isolation in der selektiven Medien.Die Kolonien waren sehr klar, feucht Disc geformt, gelbe und rosa Kolonien wurden aus verschiedenen Quellen.Die Mutter war unter kultivierten Kultur in der gleichen Medien für die Kultur Wartung.Alle Vibrio-Stämme isoliert wurden nummeriert für die einfache Identifizierung und Bequemlichkeit.Gram-Färbung Reaktion wurde von Wärme fester Verschmutzungen von Vibrio Kultur.Beweglichkeit und Form wurden Zelle, die durch direkte Beobachtung der nassen mounts frische Brühe mit Kultur-Mikroskopie.Die chacteristics von Vibrio auf TCBS Medium zeigt, dass die meisten der Isolate waren stören und in der Lage, die Produktion gelb und grün Pigmentierung.Thiosulfat-Citrat-Salze wurden-Saccharose (TCBS) Agar (Difco) ist ein selektiver häufigsten verwendete Medium zu isolieren Mitglieder der Gattung Vibrio von Mündungs-Umgebungen.Die hohe Konzentration von thiosulphate und Citrat und die starke Alkalität des Mediums weitgehend hemmen das Wachstum von Enterbacteriaceas.Oxbile unterdrücken cholate Primär-und Enterokokken. Coliforme Bakterien Alle, die wachsen, kann nicht umwandeln Saccharose.Nur ein paar Saccharose Protease-Stämme wachsen können, um aus gelb, vibriod wie Kolonien.Das gemischte Indikator Thymol blau, Bromthymolblau wechselt seine Farbe zu gelb, wenn Säure bildet auch in diesem stark alkalischen Medium
Aus 35 verschiedenen Proben gesammelt, nur 17 Proben zeigten das Vorhandensein von Vibrio sp, die meisten der marinen Proben Zusammengestellt aus verschiedenen marinen Region zeigt positive Ergebnisse für Vibrio sp, im Vergleich zu anderen Proben wie Abwasser-und Bodenproben.Und im Falle von häuslicher Wasserprobe (Trinkwasser und Mineralwasser) zeigt Abwesenheit von Vibrio strain.Vibrios sind Bewohner der aquatischen Umwelt.Sie gelegentlich Menschen infizieren, was zu Krankheiten, Darm-oder extraintestinal.Die häufigsten Krankheiten, die durch vibrios sind diejenigen, die auch berichtet, wie Cholera und andere Formen der akuten Gastroenteritis.Darüber hinaus kann es viele andere Vibrio-verursachte Krankheiten, die nicht gemeldet einige der Virulenzdeterminanten von Vibrio spp.Sind gut charakterisiert.

ENUMERATION BAKTERIELLE BEVÖLKERUNG
Die Gesamtheit der Bakterienpopulation beobachtet wurden aufgelistet und auf die marine Agarplatten und Nährstoff-Agarplatten.Die Vibrio Kolonien wurden isoliert und in einer Aufzählung TCBS Medium.Beide Populationen wurden gezählt und gezeigt

Anzeigen der gesamten Bakterienpopulation und Vibrio count.
S. NO LAGE Total bakteriellen Population Vibrio Bevölkerung
1 Marine Region 108 × 105 65 × 102
2 Garten Boden 142 × 106 21 × 102
3 Kanalisation Wasser 161 × 106 42 × 102
4 Tippen Sie auf Wasser TFTC 0
5 Mineralwasser TFTC 0

Physiologische Eigenschaften von Vibrio sp
BIO ANZAHL DER CHEMISCHEN TEST
POSITIVES ANZAHL DER
NEGATIVES
OXIDASE TEST 16 1
NITRATE TEST 16 1
CATALASE TEST 8 9
INDOLE TEST 17 0
METHYL RED TEST 17 0
VOGES PROSKEUAR 5 12
STRING TEST 17 0
CHOLERA RED RXN 4 13
CITRATE TEST 7 10
STARCH HYDROLYSE 0 17
HEAMOLYSIS 5 12
SACCHAROSE 15 2
MANNITOL, ACID 16 1
LACTOSE 0 17
GLUKOSE, ACID 17 0
GLUKOSE, GAS 1 16
MALTOSE 16 1

Mit der Berücksichtigung der Ergebnisse der physiologischen Tests, die meisten von Die Tests wurden als positiv für die Vibrio cholerae.The Isolate zeigten positive Ergebnisse für Vibrio cholerae isoliert wurden hauptsächlich aus marinen Umwelt im Vergleich zu anderen Proben wie Abwasser-und Bodenproben.Mit diesem Ergebnis, das wir beobachten, dass Vibrios sind Bewohner der aquatischen Umwelt.Marine Tiere verletzen können Menschen auf verschiedene Art und Weise.Einige Tiere verletzen, indem Infektion.Diese Infektionen durch Bakterien, die sich bei der mündlichen Einführung in das Gewebe von Opfern, die gebissen.Bakterien, die im Gewebe der marinen Tiere Infektionen verursachen können, wenn sie eingenommen wurden.Darüber hinaus Meerwasser selbst Bakterien enthält, so dass die Haut-und Weichteilinfektionen Verletzungen ausgesetzt Meerwasser sekundär injiziert werden kann.

Kirby-Bauer-Disk-Diffusion-Methode: Antibiotic Disk Susceptibilities
Die meisten der Isolate aus marinen Quelle Sehr Inzidenz der Antibiotikaresistenz war offensichtlich gegen Amoxycillin, Ampicillin, Carbencillin und Cefuroxime gefolgt von Rifampin und Streptomycin über Boden-und Abwasser-Proben.Allerdings Antibiotikaresistenz geringer war gegen Chloramphenicol, Tetracycline, Penicillin G, Nalidixicacid, Gentamycin Sulphafurazole, Trimethoprim, Neomycin und Amikacin.Dies könnte auf die Tatsache zurückzuführen, dass die terrestrische Bakterien ins Meerwasser mit Plasmiden Antibiotika resistent werden können, die für die Verbreitung der Resistenz-Gene in der Meeresumwelt.Allerdings gibt es nur wenige Berichte über die erworbene Resistenz gegen Antibiotika Ampicillin (68%), cefuroxime (66,7%), Amikacin (55%), Kanamycin (58,8%) und Trimethoprim (76,7%) und Sparus sarba in China.Es kann angenommen werden, dass anthropogene Faktoren (Krankenhaus Ableitungen) beeinflusst haben könnte in den Erwerb des Widerstands in Vibrio spp aufgrund dieser Antibiotika, da gibt es keine Berichte über den Einsatz dieser Medikamente für die Aquakultur in Indien.Allerdings sind die Ergebnisse unserer Studie dienen als Grundlage für die zukünftige Forschung über das Ausmaß der Antibiotika-Resistenz, die möglicherweise ergeben, durch Isolation von Plasmiden, ihre Effizienz und Transformation Konjugation Experimente.Die Ergebnisse der Inzidenz von mehreren Antibiotikaresistenz in Vibrios Mai Verbesserung unserer Kenntnisse über andere Stämme und deren Auswirkungen auf die künftige Therapie von Garnelen sowie menschlicher Krankheiten.Daher skrupellose Einsatz von Antibiotika gegen Krankheiten sollte vermieden werden und Einschränkungen für den Einsatz von Antibiotika kann durch ein flächendeckendes Antibiotikum Politik für Indien.

QUELLEN
1.Richard J., und Bennett N T.1993.Infections Verursacht durch Halophilic
Marine Vibrio Bakterien.Aus dem Department of Surgery, University of Florida, Gainesville, Florida Vol.217, No 5, 525-531

2.Colwell, RR und WM Spira.Die Ökologie von V. cholerae, S.107-127.
D. Barua und WB Greenough III (ed.), Cholera.Plenum Medical Book
Co., New York, NY

3.West, PA, und JV Lee.Ökologie von Vibrio spp.Einschließlich V. cholerae
in natürlichen Gewässern von Kent, England.J. Appl.52:435-448.

4.Xu, HS, NC Roberts, FL Singleton, RW Attwell, DJ Grimes und
RR Colwell.Überleben und die Rentabilität der nonculturable Escherichia coli
und Vibrio cholerae in der Mündungs-und Meeresumwelt.Ecol.
8:313-323.

5.Baumann, P., und RHW Schubert.II Familie.Vibrionaceae, S.
516-550.In NR Krieg und JG Holt (Hrsg.), Bergey's Manual of systematische
Bakteriologie, vol.1 werden.Williams & Wilkins, Baltimore, Md.

6.Farmer, JJ, III, Hickman FW-Brenner, und MT Kelly.Vibrio, S.
282-301.In EH Lennette, A. Balows, WJ Hausler, und HJ Shadomy
(Hrsg.), Handbuch für klinische Mikrobiologie, 4. Aufl..American Society for Microbiology
Washington, DC

7.Kay, BA, CA Bopp, und JG Wells.Isolierung und Identifizierung von
Vibrio cholerae O1 aus fäkal Exemplare, S.3-20.In IK Wachsmuth, PA
Blake, und O. Olsvik (ed.), Vibrio cholerae und Cholera: Molecular zu globalen Perspektiven
.ASM Press, Washington, DC

8.West, PA, und RR Colwell.Identifizierung und Klassifizierung von
Vibrionaceae - eine Übersicht, S.285-341.In RR Colwell MB und Hatem
(ed.), Vibrios in der Umwelt.John Wiley & Sons, New York, NY

9.Chun, J., A. Huq, und RR Colwell.Analyse der 16S-23S rRNA
spacer intergenischen Regionen und Vibrio cholerae Vibrio mimicus.Environ.
Microbiol.65:2202-2208

10.Nandi, B., RK Nandy, S. Mukhopadhyay, GB Nair, T. Shimada, und AC
Ghose.Rapid Methode für die Spezies-spezifische Identifizierung von Vibrio cholerae
mit Primern auf den Gen-Protein der äußeren Membran WJ
Clin.38:4145-4151.

11.Gabriella caldini, Angela neri, Stefania cresti, Vieri boddi
Gian maria rossolini, Eudes und lanciotti hohe Prävalenz von Vibrio cholerae non-o1, die Wärme-stabil Enterotoxin - Codierung Gene unter Vibrio Isolate aus einem gemäßigten Klima-Flussbecken der zentralen Italien.Umwelt-und Angewandte Mikrobiologie Juli 1997, Vol.63, Nr. 7 S.2934-2939

12.Abbott, SL, Cheung, WWKW und Janda, JM (1993) Evaluation eines neuen
selektiver Agar-Agar, thiosulfate-Chlorid-Jodid (TCI), für das Wachstum von pathogenen
Vibrio Arten.Medical Microbiology Letters 2, 362-370.

13. Morris, GK (1982) Medien für Vibrio Arten.In Quality Assurance and Quality Control of Microbiological Kultur-, Medien-ed.Corry, JEL und Verlay, GIT pp.169-174.Deutschland: Darmstadt.

14.Oliver, JD (2003) Kultur Medien für die Isolierung und Aufzählung von pathogenen
Vibrio Arten in Lebensmitteln und Umweltproben.Kultur und Medien für die Lebensmittel-Mikrobiologie
, 2. Edn eds Corry, JE, Curtis, GDW und Baird, RM
Amsterdam: Elsevier Science, in press.

15.Ferguson, GE, CW Lingham, SK Liebe, und R. 0.Springs of Florida, P.Fla Geol.Bull..Nein.E. 0.Printing Co., DeLand, Fla

16.Lee, JS 1973.Was Meeresfrüchte-Prozessoren sollten wissen, über Vibrio parahemolyticus.J. Milch Food Technol.36:405-408.

17.Gopal, S, SK Otta, ich Karunasagar, M Nishibuchi, und ich Karunasagar."Das Auftreten von Vibrio Arten in den Tropen Garnelen Kultur-Umgebungen; Folgen für die Lebensmittelsicherheit."International Journal of Food Microbiology.2005 Jul 15; 102 (2) :151-9.

18.Graf, J. "The Light-Organ Symbiosis von Vibrio fischeri und die Hawaiian Squid, Euprymna scolopes."Februar 2005.Accessed 8. Juli 2005.

19.Ho, Hoi."Vibrio-Infektionen."EMedicine.22. Mai 2005.Accessed 8. Juli 2005.

20.Oliver, JD."Wound Infektionen durch Vibrio vulnificus und anderer mariner Bakterien."Epidemiologie und Infektion.2005 Jun; 133 (3) :383-91.

21.Sarkar, M, S Das, A Bandyopadhaya, Ray K und K Chaudhuri."Upregulation der menschlichen mitochondrialen NADH-Dehydrogenase-Untereinheit 5 in Darmepithelzellen ist moduliert durch Vibrio cholerae Pathogenese."FEBS Buchstaben.2005 Jun 20; 579 (16) :3449-60.

22.Senoh, Mistutoshi, Shin-Ichi Miyoshi, Keinosuke Okamoto, Belen Fouz, Carmen Amaro, und Sumio Shinoda."Die Cytotoxin-Hemolysin Gene von Mensch und Aal pathogenen Vibrio vulificus Strains: Vergleich der Sequenzen Nucelotide und Anwendung auf die genetische Gruppierung. Mikrobiologie und Immunologie. 2005; 49 (6) :513-9.

23.Gerhard , P., RGEMurray, RNCostilow, EWNester, WAWood, NRKrieg, andG.B.phillips.1981.Manual der Methode für generalbacteriology.American GESELLSCHAFT FÜR Mikrobiologie, Washington, DC
24. Mary. L. G und rita r. Colwell, Enumeration, Isolierung und Charakterisierung von N2 zur Festsetzung Bakterien aus Meerwasser. Abteilung für Mikrobiologie der Universität von Maryland. Vol. 50 keine .2. 1985

Andere Referenzen

1.Dennis Kunkel Microscopy, Inc.
2.Fix, Douglas F. "Vibrio." Accessed 8. Juli 2005.
3.Todar, Kenneth. Todar's Online Textbook of Bacteriology. 2005. Zugangsdatum 8. Juli 2005.
4.Vibrio fischeri Genome Project. 19. September 2002. Zugangsdatum 8. Juli 2005.
5.